一.是非题.15分
1.对
2.对
3.错
4.错
5.错
6.对
7.错
8.对
9.对
10.错
11.错
12.错
13.错
14.错
15.错
16对.
二.填空题.30分
1.a,b烘箱热空气灭菌法，火焰灼烧法。
2.蛋白胨，牛肉膏，硫酸胺，硝酸钠，豆饼粉。
3.球状、杆状、螺旋状。
4.N乙酰胞壁酸，N乙酰葡萄糖胺，短肽。
5.吡哆二磷酸，DPA。
6.林奈氏双名法，属名，种名。
7.细胞质膜，生物氧化，核分裂，横隔壁，胞外酶分泌。
8.鞭毛蛋白，运动。
9.多糖，肽等，负染。
10.几丁质等。甘露聚糖，葡聚糖。
11.固体、液体和半固体。
12.无细胞壁。
13.细胞骨架和能源。
14.细菌和霉菌，细菌，基内菌丝，气生菌丝，孢子丝。
15.子囊孢子，接合孢子，卵孢子。质配，核配，减数分裂，单倍体。
16.青霉属
17.5.X109
18.RNA,cDNA,mRNA。
19.大肠杆菌，呼肠孤病毒或假单胞菌的?.6病毒。
20..枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，北京棒状杆菌，产氨短杆菌，德氏乳酸杆菌，丙酮丁醇梭状芽孢杆菌。
21.微好氧菌，好氧菌，兼性厌氧菌，耐氧菌，厌氧菌。
三.问答题
在营养物浓度很低的情况下，营养物的浓度影响细菌的生长速率。随着营养物浓度的逐步增高，营养物浓度不影响生长速率，但影响最终的菌体产量。如果进一步提高营养物浓度，营养物浓度不影响生长速率，不影响最终菌体生成量。

细胞大小、形态；繁殖体在胞内的位置，形态及数量；鞭毛线毛的位置和数量；内含物的种类；细胞器的结构、数量；菌落形状、大小、色泽、硬度、光滑度等；菌丝的有无分隔；分生孢子梗，孢子囊等形态结构；病毒的噬菌斑、包含体，头部、尾部结构；

在实验室中常用：

试管液体培养：此法的通气效果一般较差。仅适用于进行微生物的各种生理生化试验。

摇瓶培养将装有液体培养基的三角瓶（摇瓶），上盖8-12层纱布或用疏松的棉塞塞住以阻止空气中杂菌或杂质进入瓶内，而空气可以透过阻隔供菌呼吸之用。将摇瓶放在摇瓶机（摇床）上以一定速度保温振荡培养。摇瓶培养不仅操作简便，而且可以将许多摇瓶（在大摇床上可多达上百个）同时在相同的温度和振荡速度等条件下进行培养试验。摇瓶培养在实验室里被广泛用于微生物的生理生化试验、发酵和菌种筛选等，也常在发酵生产中用于种子培养。(3)台式发酵罐实验室用的发酵罐体积一般为几升到几十升。一般都有多种自动控制和记录装置。如配置有pH、溶解氧、温度和泡沫检测电极，有加热或冷却装置，有补料、消泡和pH调节用的酸或碱储罐及其自动传送装置。因为它的结构与生产用的大型发酵罐接近，所以，它是实验室模拟生产实践的试验工具。
在生产中常用：

浅盘培养(shallowpanculture)容器中盛装浅层液体静止培养，没有通气搅拌设备，全靠液体表面与空气接触进行氧气交换。这是最为原始的液体培养形式。

发酵罐深层培养液体深层培养的主体设备是发酵罐。发酵罐可以为微生物提供丰富而均匀的营养，良好的通气搅拌，适宜的温度和酸碱度，并能防止杂菌污染。为此，它配备有培养基配制系统、蒸汽灭菌系统、空气压缩过滤系统和补料系统。生产效率较高，易于控制，产品质量稳定，因而在发酵工业中被广泛应用。但是，深层培养耗费的动力较多，设备较为复杂，需要较大的投资。

青霉素是肽聚糖单体五肽末端的D-丙氨酰-D-丙氨酸的结构类似物，它们相互竞争转肽酶的活性中心。当转肽酶与青霉素结合后，因前后两个肽聚糖单体间的肽桥无法交联，因而只能合成缺乏正常机械强度的缺损肽聚糖，从而形成细胞壁缺损的细胞。因为它是抑制肽聚糖的合成，因此对生长旺盛的微生物具有明显的抑制作用，而对生长休止状态的细胞，则无作用；溶菌酶广泛存在于卵清、人的泪液和鼻涕、部分细菌和噬菌体中，它能有效地水解细菌的肽聚糖，其作用部位就是N-乙酰胞壁酸的1位碳和N-乙酰葡萄糖胺的4位碳之间的Alpha-1,4糖苷键。它对生长期和休止期的细胞均有作用。

a.液体稀释法对未知菌样作连续的10倍系列稀释。根据估计数，从最适宜的3个连续的10倍稀释液中各取5ml试样，接种到3组共15支装有培养液的试管中（每管接入1ml）。经培养后，记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查MPN(mostprobablenumber)表，再根据样品的稀释倍数就可计算出其中活菌含量。
b.平皿菌落计数法将发酵液稀释后涂布在固体培养基表面，也可将熔化后冷却至45-50℃的固体培养基与一定稀释度的菌悬液混合，凝固后培养适当时间，测定菌落形成单位的数目。不同菌种的菌落大小不同，一般控制在9厘米培养皿中生长50-500个菌落为佳。该法可以反映样品中活菌的数量。较适合于细菌和酵母菌，不适于霉菌。有人将培养基放在固定于载玻片上的小环中，将细胞接种到这微型平板上，经短时间培养后，将其移到显微镜下观测菌落数目。与以上平皿计数法相比，它能更快速获得结果。
c.细胞组分ATP定量法ATP在一定的微生物细胞中含量很稳定，一般是10-6M数量级。典型细菌细胞的ATP含量为每克细胞干重含有1毫克ATP。因为细胞死亡几分钟内，ATP就会被水解，所以，以ATP为指标，可以快速、灵敏地反映活菌体数量。ATP测定可以利用萤光素酶催化的生物发光反应。

9恒化培养与恒浊培养的比较
装置
控制对象
生长限制因子
培养液流速
生长速度
产物
应用范围

恒化器
培养液流速
有
恒定
低于最高生长速度
不同生长速度的菌体
实验室为主

恒浊器
菌液密度
无
不恒定
最高生长速度
大量菌体或与菌体生长平行的代谢产物
生产为主